GeneCopoeia 提供荧光素酶载体构建、细胞转染、稳转细胞系和报告基因检测相关的的全程解决方案。

荧光素酶报告基因检测操作流程
荧光素酶报告基因解决方案

1 荧光素酶载体构建

• GLuc-ON™ 转录响应（TRE）克隆

GLuc-ON™ 转录响应 (TRE) 克隆可以用于在哺乳动物细胞系上进行快速灵敏的信号通路分析。这些克隆使用分泌型的 Gaussia Luciferase (GLuc) 作为报告基因，通过灵敏而显著的荧光反应，检测特定信号通路对环境刺激物或其他实验操作的生物应答。GLuc 基因是一个分泌型的蛋白，无需裂解细胞就能从培养基中获得实验样本进行快速方便的检测。  

• GLuc-ON™ 启动子报告克隆

GeneCopoeia 提供预制和定制的 GLuc-ON™ 启动子克隆，包括单报告基因载体系统和双报告基因载体系统。单报告基因载体系统以 Gluc 作为启动子的报告基因；双报告基因载体系统以 Gluc 作为启动子报告基因，以分泌型碱性磷酸酶（SEAP）作为信号标准化的内参，可在活细胞中对超过 20,000 种人和 18,000 种小鼠启动子进行实时活性分析。  

• miRNA 3' UTR 克隆

GeneCopoeia 提供两套 3'UTR 报告载体。在 pEZX-MT05 载体中，我们将 3' UTR 序列（来源于公开的基因序列数据库）插入到 Gaussia 荧光素酶报告基因下游，在哺乳动物细胞中由 SV40 启动子驱动转录生成 Gaussia 荧光素酶（Gluc）和 3' UTR 靶标序列的嵌合 mRNA，因此无需裂解细胞实时监测 Gluc 的表达，研究 mRNA-miRNA 的相互作用。在相同载体（pEZX-MT05）上带有分泌型碱性磷酸酶（SEAP）报告基因。CMV 启动子驱动转录的 SEAP 作为同质粒内的对照，这种双报告系统可以对多样本常规转染进行精确比较。
pEZX-MT06 是 Firefly/Renilla 双荧光素酶报告载体。3' UTR 序列在 Firefly（hLuc）荧光素酶报告基因下游，CMV 启动子驱动转录的 Renilla（hRLuc）作为同质粒内的对照。通过裂解细胞检测 hLuc 和 hRLuc 的表达。


2 细胞转染

• EndoFectin™ 转染试剂

GeneCopoeia 现推出的 EndoFectin™ Max 是基于脂质体转染原理的转染试剂，该试剂具有多种细胞的广泛通用性，经优化设计，在多种常用细胞系中表现优良，具有较高转染效率。

产品优势：

1. 转染效率高，适用于多种细胞系的转染
2. 细胞毒性低，保证高细胞活性
3. 简化操作流程，转染前无需去除细胞培养液和血清，转染后无需清洗细胞或更换培养基
4. 多种用途，可用于基因过表达、基因敲减/敲除和微孔板的高通量转染操作

 

• 慢病毒包装

慢病毒载体是将目的基因序列导入普通细胞与难转染细胞中的一种强有力手段。GeneCopoeia 既提供预制的纯化慢病毒，也可根据客户需求进行定制。

产品优势:

1. 慢病毒可即时用于实验，节约时间与成本；
2. 严格的质量控制，保证高品质与高滴度；
3. 可有效转导目的基因至难转染细胞和动物模型。

3 稳转细胞株

GeneCopoeia 提供针对若干个信号通路设计的转录响应 (TRE) 细胞系带有分泌型的 Gaussia Luciferase (GLuc) 标记，可以通过灵敏而显著的荧光反应，检测特定信号通路对环境刺激物或其他实验操作的生物应答。GLuc 基因是一个分泌型的蛋白，无需裂解细胞就能从培养基中获得实验样本进行快速方便的检测。TRE 稳定细胞系可以避免研究人员花费 2 个月或更长时间来构建和验证一个稳定的细胞系。

4 报告基因检测

GeneCopoeia 提供非分泌型和分泌型荧光素酶检测试剂，其中，按照非分泌型荧光素酶检测试剂盒，按照用途划分又包括适用于高通量分析的稳定型和高灵敏性，按照荧光种类划分，又包括萤火虫（Firefly luciferase ，FLuc）和海肾（Renilla luciferase ，Rluc）双荧光，或单荧光。

产品优势：

1. 与 Promega 产品效果一致，价格优惠 50%
2. 兼容 Promega pGL3~4 相对应载体，可代替 Promega E1910 等试剂
3. 适用于多种不同细胞系样品的检测
4. 对萤火虫和和海肾荧光素酶极度敏感