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怎样快速构建好表达载体?
人阅读 发布时间:2019-12-26 11:00
GeneCopoeia 提供的 EZShuttle™ 重组克隆体系应用 E.coli 和λ噬菌体特异位点的重组酶促体系使 DNA 片段在载体间相互转换,其原理与 Gateway® 克隆技术相同,使您迅速获得您想要的载体。
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与经典克隆方法相比
经典克隆方法基于限制性内切酶的克隆通常导致 DNA 产量大幅 降低且具有高背景,难以筛选正确的克隆。EZShuttle™ 重组克隆,重组两种不同质粒的 att 位点无需纯化 DNA 片段,同时反选择标记 ccdB 和正选择标记 Amp 的存在显著减少了背景。
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与 Gateway® 克隆技术相比
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产品应用
√ 构建即用型表达克隆:使穿梭克隆或其它 DNA 片段插入到表达载体
√ 蛋白质纯化:使目的基因在一个或多个系统中表达,然后用于蛋白质纯化、形成结晶、抗体的制备、DNA 结合化验等
√ 启动子交换:克隆目的基因到带有不同启动子的载体
√ 启动子分析:利用报告基因测试不同启动子的功能
√ 基因标签:表达不带标签或带有不同融合标签的目的基因;可用于免疫共沉淀或亚细胞定位等
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产品优势
√ 高兼容性:与 Gateway® 克隆技术完全兼容
√ 高准确性:转换载体后 DNA 序列精确不变,无需二次测序
√ 简易灵活:无需酶切、电泳、割胶和纯化 DNA
√ 多选择性:提供具有大量筛选标记和标签的 pEZ™ 表达载体
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EZShuttle™ 重组克隆体系构成
√ EZShuttle™ BP 重组克隆体系
该体系可以生成含有目的片段的 EZShuttle™ 或 Gateway® Entry clone
▸ EZRecombinase™ BP Mix
▸ pShuttle™ 载体
pShuttle-D01 通过 BP 重组技术生成穿梭克隆
pShuttle-D02 通过酶切-连接方法生成穿梭克隆
pShuttle-D03 通过同源重组方法生成穿梭克隆
▸ OmicsLink™ 即用型 ORF 表达克隆
即用型 ORF 表达克隆可以在体内体外即时表达,帮助客户更迅速地得到研究结果,更快地发表文章。
√ EZShuttle™ LR 重组克隆体系
该体系可以生成含有目的片段的 pEZ™ 表达载体或 Gatewayt® pDEST 载体
▸ EZRecombinase™ LR Mix
▸ pEZ™ 表达载体
含有不同类型的启动子、筛选标记和标签;
包含 safe harbor 基因敲入克隆载体,用于 CRISPR-或 TALEN 介导的人类 AAVS1 或小鼠 ROSA26 位点的基因敲入。
▸ EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭克隆
约 35,000 种人和小鼠的 EZShuttle™ Gateway® PLUS 穿梭克隆;其包含的 ORF 都经过全长测序验证
带有多克隆位点,也可用于经典的的酶切-连接克隆过程
技术详情请联系,技术支持 020-32068595